双荧光素酶报告基因系统

miRNA靶基因荧光素酶报告载体


      许多重要的调节基因受miRNA调控,如Ers受let-7调控,Bcl-2受miR-15和miR-16调控,TPM1受miR-21调控。scigebio开发的miRNA靶基因荧光素酶报告载体可用于研究miRNA是否对靶基因存在调控作用。在荧光素酶报告基因下游插入靶基因3’ UTR区域,通过对荧光素酶报告基因表达的检测,即可研究体内miRNA对靶基因的调控作用。


A.产品优势

        功能性检测——一种功能性的分析方法,用于检测体内miRNA对靶基因的调控作用;

        可定量分析——miRNA介导的调控可以通过荧光素酶报告基因的表达进行定量检测;

        可构建稳定细胞系——载体可用于构建表达报告基因的稳定细胞系。


B.技术原理

       miRNA与位于荧光素酶RNA下游的靶基因3' UTR结合,抑制荧光素酶表达,使酶活性下降。通过比较两个样本的荧光素酶活性,可研究miRNA对靶基因的调控作用。

C.载体图谱




D.结果展示


       实验组使用的质粒是pLu-Ets1-3UTR,该质粒在pLuc载体荧光素酶报告基因3'端插入包含miR-200b靶位点的Ets-1 3'端UTR序列;对照组使用空pLuc载体。图中空心柱和实心柱分别表示对照以及miR-200b转染细胞后的结果。


相关推荐